文献类型: 中文期刊
作者: 张贺 1 ; 翟少伦 1 ; 罗满林 1 ; 吕殿红 1 ; 温肖会 1 ; 魏文康 1 ;
作者机构: 1.广东省农业科学院动物卫生研究所动物疫病诊断中心;广东省畜禽疫病防治研究重点实验室;农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站;华南农业大学兽医学院
关键词: 犬瘟热病毒;F基因;H基因;真核表达;pcDNA3.1(+);BHK-21
期刊名称: 黑龙江畜牧兽医
ISSN: 1004-7034
年卷期: 2018 年 21 期
页码: 172-175+179+264
收录情况: 北大核心
摘要: 为了研究虎源犬瘟热病毒(CDV)主要保护性抗原基因(H基因和F基因)的免疫原性,参照GenBank上发表的CDV基因全长序列(KP793921)设计了两对引物,特异性扩增CDV的F和H基因,利用pcDNA3. 1(+)真核表达载体构建了CDV核酸疫苗(质粒pcDNA3. 1-F和pcDNA3. 1-H),通过脂质体介导法将这两种真核表达质粒分别转染BHK-21细胞,通过RT-PCR、间接免疫荧光和Western-blot检测重组质粒在体外细胞的表达情况;通过肌肉免疫Balb/c小鼠,检测重组质粒在体内的表达情况。结果表明:真核表达载体pcDNA3. 1-F和pcDNA3. 1-H被成功构建,F、H蛋白均具有免疫原性,但诱导抗体效价不高,有待进一步研究改善。说明pcDNA3. 1-F和pcDNA3. 1-H重组疫苗可以诱导产生抗CDV的中和抗体,但是抗体效价较低,需要进一步试验分析解决。
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