文献类型： 中文期刊

作者： 吴颖 ¹ ; 邓益琴 ² ; 张策 ¹ ; 李席席 ¹ ; 张晨 ¹ ; 梁思轩 ¹ ; 徐雪峰 ¹ ; 赵哲 ¹ ;

作者机构： 1.河海大学江苏省海洋生物资源可持续利用工程研究中心

2.中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室

关键词： 哈氏弧菌;Ⅲ型分泌系统;vcrD基因;细胞凋亡

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2024 年 003 期

页码： 779-791

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【背景】哈氏弧菌（Vibrio harveyi）是一种革兰氏阴性细菌，也是海洋动物的重要条件致病菌之一。Ⅲ型分泌系统（typeⅢsecretionsystem,T3SS）是革兰氏阴性致病菌中保守存在的毒力装置，已被公认在细菌致病过程中起着关键作用。【目的】探索哈氏弧菌T3SS诱导鱼类细胞死亡的机制。【方法】采用基因敲除和回补手段获得了T3SS功能缺失的哈氏弧菌345的缺失突变和回补株。利用4’,6-二脒基-2-苯基吲哚（4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI）染色、原位末端转移酶标记技术（TdT-mediated dUTP nick-end labeling, TUNEL）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（cysteinyl aspartatespecific proteinase, Caspase）活性测定和lactate dehydrogenase （LDH）释放测定等技术揭示哈氏弧菌T3SS导致的细胞死亡特征。【结果】哈氏弧菌345依赖T3SS能迅速导致鱼类细胞变圆并脱落，细胞核皱缩，部分细胞呈现DNA片段化、形成凋亡小体，细胞凋亡关键分子Caspase-3被激活；此外，哈氏弧菌T3SS还导致鱼类细胞的细胞膜通透性改变，LDH等内容物被释放，并且抑制凋亡途径的激活并不能阻止细胞内容物的释放和细胞变圆。【结论】哈氏弧菌利用T3SS体外诱导鱼类细胞发生细胞凋亡途径的激活和细胞变圆，最终导致细胞发生死亡。