文献类型： 中文期刊
作者： 张芳芳 1 ; 徐甲坤 2 ; 王芳 2 ; 郭辉 1 ; 梁兴国 1 ;
作者机构： 1.中国海洋大学食品科学与工程学院
2.中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点实验室
关键词： 生物催化剂;肌红蛋白;基因突变;催化性能;计算机模拟
期刊名称： 中国海洋大学学报(自然科学版)
ISSN： 1672-5174
年卷期： 2017 年 47 卷 04 期
页码： 46-51
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 利用计算机模拟与基因工程相结合的方法,对抹香鲸肌红蛋白活性中心疏水空穴进行设计,重点研究了肌红蛋白活性部位68、107位置的氨基酸(大小、疏水性)对肌红蛋白催化性能的影响。设计、制备、表达并纯化了H64D/I107V、H64D/I107A和H64D/I107G三种变体,测试了不同变体对吲哚羟基化反应的催化性能,并通过计算机模拟阐明肌红蛋白活性部位构筑与其催化性能之间的联系。研究表明:H64D/I107V、H64D/I107A和H64D/I107G三种变体均能催化吲哚的羟基化反应,kcat分别为10.6、9.2和25.2min~(-1);证明了107位置氨基酸的空间位阻效应和68位置氨基酸的疏水性能够显著影响底物在蛋白活性部位的空间构象,进而影响肌红蛋白的催化性能。研究结果为基于肌红蛋白新型生物催化剂的开发提供了新的实验依据与理论基础。
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