文献类型： 中文期刊
作者： 李忠磊 1 ; 王跃军 1 ; 盛军 1 ; 刘均忠 1 ; 孙谧 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所
关键词： Y.lipolytica Bohaisea-9145;毕赤酵母GS115;基因克隆;异源表达;性质
期刊名称： 海洋与湖沼
ISSN： 0029-814X
年卷期： 2012 年 43 卷 02 期
页码： 230-236
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 采用基因重组和分子生物学相关技术,对Yarrowia lipolytica Bohaisea-9145海洋低温碱性脂肪酶(Y.lipolytica Bohaisea-9145,LipYp)基因lipYp(1116bp)克隆并在Pichia pastoris中进行了异源真核表达研究。通过MD和MM平板及PCR扩增,筛选和鉴定了重组子。结果表明,阳性重组子经摇瓶发酵54h后上清液酶活力达到1956U/ml。发酵液经两步纯化得到在SDS-PAGE上显示为单一条带的重组脂肪酶。实验同时研究了不同反应温度、pH值对重组LipYp活力和稳定性的影响,结果显示重组LipYp最适反应温度和pH分别为35℃和8.5,在pH7.0-10.5之间以及45℃以下有较好稳定性。另外,重组脂肪酶对中长链对硝基苯基酯类和甘油三酯类(C10-C12)有较强的水解能力。
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