文献类型： 中文期刊
作者： 马冬梅 1 ; 白俊杰 1 ; 简清 1 ; 劳海华 1 ; 叶星 1 ; 罗建仁 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所
关键词： 中华鲟半胱氨酸蛋白酶抑制剂;毕赤酵母;基因表达;蛋白酶抑制活性
期刊名称： 生物工程学报
ISSN： 1000-3061
年卷期： 2003 年 19 卷 05 期
页码： 88-92
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为研究鱼类半胱氨酸蛋白酶抑制剂 (Cystatin)的功能并探索其在水产加工和病害防治中的应用潜力 ,将PCR改造后的编码成熟肽中华鲟 (Acipensersinensis)cystatin基因亚克隆到毕赤酵母整合型表达载体pPICZαA ,氯化锂法转化毕赤酵母菌株GS115 ,构建表达cystatin的酵母基因工程菌。经甲醇诱导、SDS PAGE检测培养基上清液 ,表明中华鲟cystatin在毕赤酵母中实现了高效表达 ,重组cystatin表达量约为 2 15mg·L- 1 。纯化后重组蛋白纯度达94 .2 %。生物活性检测结果表明 ,1μg重组中华鲟cystatin约能抑制 15 μg木瓜蛋白酶的水解活性
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