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黄地老虎颗粒体病毒DNA片段在枯草芽孢杆菌中的克隆和启动氯霉素抗性基因表达

文献类型： 中文期刊

作者： 郭三堆 1 ; 邱并生 2 ; 裴美云 2 ; 贾士芳 2 ; 艾秀莲 3 ;

作者机构： 1.中国农业科学院生物技术研究所

2.中国科学院微生物研究所

3.新疆农业科学院微生物研究所

关键词： 启动基因;黄地老虎颗粒体病毒;枯草芽孢杆菌

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 1985 年 1 卷 03 期

页码： 26-31，86

摘要： 黄地老虎颗粒体病毒(Agrotis segetum granulosis virus简称AsGV)DNA和pPL603质粒DNA,用限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ酶切后,再用T_4连接酶连接,转化枯草芽孢杆菌BR151感受态细胞。然后在10μg/ml氯霉素的SPBY选择平皿上筛选,得到了抗氯霉素的转化子。经过琼脂糖凝胶电泳检测,转化于中的重组质粒比原载体pPL603质粒分子量大。由于重组质粒上的抗性表达水平可达250μg/ml氯霉素,比pPL603质粒抗性表达水平(5μg/ml)提高50倍。所以重组质粒携带了有启动作用的DNA片段。启动功能片段的分子量,经琼脂糖凝胶电泳测定约为0.9kb。除进行DNA-DNA分子杂交确证外,并用重组质粒pAsGVP15进行了第二次转化、抗性水平测定和分子量分析。

  • 相关文献

[1]黄地老虎颗粒体病毒cDNA文库的构建. 张伟,王玮,艾秀莲,谢玉清,冯怀蓉. 2003

[2]黄地老虎颗粒体病毒的研究——Ⅵ.均一完整的AsGV DNA的制备和鉴定. 曹旭,裴美云,王小凤,艾秀莲,刘延娜. 1986

[3]黄地老虎颗粒体病毒杀虫剂应用研究. 吴祖银,张超礼,危信民,赵恒,王卫国,胡正远,康宁,谭冬庄,慕希旺. 1987

[4]热纤维素梭菌内切葡聚糖苷酶基因在枯草芽孢杆菌的表达. 楚敏,杨红梅,王芸,娄恺. 2008

[5]枯草芽孢杆菌随水滴施防治棉花黄萎病的应用研究. 娄善伟,王大光,张鹏忠,鹿秀云,边洋,张晓东,马腾飞,张怀军. 2015

[6]重组枯草芽孢杆菌产极端耐热木聚糖酶条件的优化. 张伟,娄恺,李冠. 2009

[7]新疆双峰驼源枯草芽孢杆菌的分离及全基因组分析. 吴贝灵,杨蓉,崔卫东,买尔哈巴·艾合买提,侯新强,侯敏,陈钢粮. 2024

[8]一株产纤维素酶细菌液体发酵条件的初步研究. 王炜,付建红,崔卫东,徐斌. 2002

[9]生防菌Bacillus subtilis DNKAS全基因组测序及生物膜形成相关基因分析. 王骞,包慧芳,丁荣荣,史应武,杨红梅,楚敏,王宁. 2022

[10]枯草芽孢杆菌N1729对棉花主要病原菌的抑菌作用及其蛋白特性的初步研究. 陈莉,缪卫国,刘海洋,努尔孜亚. 2007

[11]枯草芽孢杆菌种子包衣对棉花黄萎病抑制作用的研究. 娄善伟,张鹏忠,王大光,鹿秀云,边洋,那马加普,马腾飞,努尔塞吾来,张晓东. 2016

[12]黄地老虎颗粒体病毒DNA片段在枯草芽孢杆菌中的克隆. 郭三堆,邱并生,石玉瑚,裴美云,刘延娜,吴祖银,郭兴华,王卫国. 1985

[13]极端耐热木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌中的整合表达. 张伟,李冠,娄恺. 2010

[14]利用多菌种共发酵生产饲用复合酶的研究. 王炜,付建红. 2001

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