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绍兴鸭α-干扰素基因克隆、表达及活性测定

文献类型: 中文期刊

作者: 叶伟成 1 ; 张存 1 ; 王一成 1 ; 刘蔓雯 1 ; 徐丽华 1 ; 袁秀芳 1 ; 张燕 1 ;

作者机构: 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 绍兴鸭;α-干扰素;基因克隆;原核表达

期刊名称: 浙江农业学报

ISSN: 1004-1524

年卷期: 2005 年 17 卷 03 期

页码: 115-119

收录情况: CSCD

摘要: 采用PCR法从绍兴鸭的肝组织基因组DNA中扩增出α干扰素基因,插入pUC18载体,进行序列测定及分析;将成熟α干扰素基因亚克隆到表达载体pET 28α(+)中,并转化入大肠杆菌BL21进行表达;表达产物经复性后,进行抗病毒活性的测定。测序结果表明,该基因(sxDuIFN α)由576个核苷酸组成,共编码191个氨基酸。该基因与GenBank公布的鸭α干扰素基因(X84764,AB128861)的核苷酸序列同源性分别为99.3%和99.1%,氨基酸序列同源性均为97.9%。表达载体经IPTG诱导表达出相对分子量为20.7kD的DuIFN α。该产物经细胞病变抑制法测定,显示出具有明显的抗猪水泡性口炎病毒(VSV)及鸭瘟弱毒疫苗毒的活性。

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