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重组NP蛋白抗原检测SIV抗体间接ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 王方昆 1 ; 袁秀芳 1 ; 刘思当 2 ; 张存 1 ; 徐丽华 1 ; 王一成 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院

2.山东农业大学

关键词： 猪流感;重组NP蛋白;ELISA

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2008 年 20 卷 06 期

页码： 408-413

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用纯化的H9N2亚型猪流感可溶重组NP蛋白作为包被抗原,建立了检测猪流感抗体的间接ELISA方法。ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为12.5μg/mL,37℃1 h,4℃过夜;血清稀释度为1∶40;酶标SPA稀释度为1∶10 000,37℃温育40 min,底物显色37℃15 min。经重复性试验、交叉试验、竞争抑制试验等试验,结果表明该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。利用TG-ROC软件确定了自制ELISA(NP-ELISA)酶标板的临界值为0.20,特异性和敏感性分别为95.83%和91.43%。与美国IDEXX试剂盒相比较,符合率为94.00%,无显著性差异。用已建立的ELISA方法检测临床血清样本356份,总阳性率为35.40%。

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[2]猪繁殖与呼吸综合征和猪流感混合感染的诊断. 顾小根,俞国乔,朱家新,赵灵燕,方兰勇,陆国林,赵国源,王勇,蔡雪晖,李海燕,谷根林,王一成. 2002

[3]纳米金增强PRRSV GP5蛋白在小鼠体内的免疫效果研究. 牛登元,王一成,袁秀芳,徐丽华,张存,李军星. 2010

[4]The selection of ELISA cut-off points for testing antibody to Newcastle disease by two-graph receiver operating characteristic (TG-ROC) analysis. Xu, H,Lohr, J,Greiner, M. 1997

[5]Monoclonal antibodies detect a single amino acid difference between the coat proteins of soilborne wheat mosaic virus isolates: Implications for virus structure. Chen, JP,Torrance, L,Cowan, GH,MacFarlane, SA,Stubbs, G,Wilson, TMA. 1997

[6]Short communication. Enhancement of the immune responses to vaccination against foot-and-mouth disease in mice by oral administration of Quillaja saponaria-A and extracts of Cochinchina momordica seed. Xiao, C. W.,Bao, G.,Rajput, Z. I.,Hu, S. H.,Rajput, Z. I.,Soomro, N. A.. 2013

[7]Rapid methods for detecting acrylamide in thermally processed foods: A review. Hu, Qinqin,Fu, Yingchun,Li, Yanbin,Xu, Xiahong,Li, Yanbin.

[8]猪流行性腹泻病毒N重组表达蛋白间接ELISA检测方法建立. 顾昀,周晓丽,袁秀芳,杜晓莉,徐丽华,李军星,方维焕,王一成. 2015

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