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基因芯片检测鱼类病毒的方法建立与优化

文献类型: 中文期刊

作者: 王胜强 1 ; 耿伟光 1 ; 李晋 1 ; 粟子丹 1 ; 史成银 1 ;

作者机构: 1.农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词: 病毒;基因芯片;高通量检测;鱼类

期刊名称: 中国动物检疫

ISSN: 1005-944X

年卷期: 2015 年 07 期

页码: 77-81+84

摘要: 本研究建立并优化了一种基因芯片检测方法,可以同步检测7种重要的海水养殖鱼类病毒(淋巴囊肿病毒、细胞肿大病毒属虹彩病毒、赤点石斑鱼神经坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、传染性胰脏坏死病毒、病毒性出血败血症病毒、传染性鲑贫血病毒)。该基因芯片包含10条病毒特异性的寡核苷酸探针(25~30mer)分别与病毒的CP、N、VP5、G、NS、MA等基因位点互补。将各病毒基因探针以50%DMSO稀释至20μmol/L,使用Personal Arrayer 16个人点样仪在醛基修饰玻片上点样,然后与Cy3标记的扩增产物在47℃条件下杂交1.5 h,最后在Lux Scan 10K扫描仪上采集荧光信号、判断检测结果。初步应用表明,该基因芯片检测方法具有良好的特异性和可靠性,在鱼类病毒高通量检测技术领域有广泛的应用前景。

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