文献类型： 中文期刊

作者： 王宏宇 ¹ ; 朱寅初 ² ; 云涛 ² ; 华炯钢 ² ; 叶伟成 ² ; 倪征 ² ; 陈柳 ² ; 张存 ² ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所

2.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 鹅星状病毒;一步法RT-PCR;基因型;检测方法

期刊名称： 浙江农业科学

ISSN： 0528-9017

年卷期： 2021 年 62 卷 011 期

页码： 2299-2302,2309

摘要： 鹅星状病毒(GAstV)是近年临床新发病原,也是导致当前雏鹅痛风致死的主要病因,研究显示该病毒存在两种不同基因型.为建立快速准确的核酸鉴别诊断方法,本研究针对不同基因型GAstV保守域RNA依赖性RNA聚合酶序列各设计1对特异性引物,建立以RNA为模板的双重一步法RT-PCR检测方法.条件优化试验结果显示,双重RT-PCR方法彼此无干扰;引物特异性强,对坦布苏病毒、鹅细小病毒、呼肠孤病毒、鸭瘟病毒的检测均为阴性;体系中引物适宜浓度为1μmol,退火温度范围广,50~54℃皆可;敏感性高,最低检测限分别为103拷贝数和102拷贝数.对采集自江浙地区的73份样品进行检测,结果显示,鹅星状病毒阳性率为93.2%,主要为Ⅱ型星状病毒的单一感染(阳性率86.3%),部分样品呈现两种类型星状病毒混合感染现象(阳性率6.8%).上述结果表明本研究建立的双重RT-PCR方法可用于GAstV的鉴别诊断和分子流行病学调查.