文献类型： 中文期刊
作者：
李杰
1
;
张星星
2
;
郭晶
3
;
张国武;
王晓婷;
李妍;
才学鹏;
孟庆玲;
乔军;
作者机构： 1.石河子大学动物科技学院
2.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所
3.中国农业科学院兰州兽医研究所
关键词： 非洲猪瘟病毒;P30-54融合蛋白;杆状病毒表达系统;反应原性
期刊名称： 西南农业学报
ISSN： 1001-4829
年卷期： 2019 年 3 期
页码： 684-688,699
摘要： [目的]非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种严重危害猪养殖业的急性烈性传染病.[方法]为了制备特异性强、敏感性高的ASFV血清学诊断用抗原,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达了ASFV P30-54融合蛋白基因.将P30-54融合蛋白基因克隆入杆状病毒转座载体质粒pFastBac1中,构建重组质粒pFastBac-P30-54;将重组质粒转化DH10 Bac感受态细菌进行重组,经抗性与蓝白斑筛选得到杆状病毒重组质粒Bacmid-P30-54;将reBacmid-P30-54转染sf9细胞,获得重组杆状病毒reAcMNPV-P30-54.将获得的reAcMNPV-P30-54接种sf9细胞,待细胞出现CPE时收集细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)和SDS-PAGE进行分析重组蛋白的表达情况;通过Western blot检测重组蛋白的反应原性.[结果]在重组杆状病毒中成功表达P30-54蛋白,该重组蛋白可与ASFV多克隆抗体发生免疫学反应.[结论]证实该重组蛋白具有良好的反应原性.
- 相关文献
[1]非洲猪瘟病毒p30-54融合蛋白基因的构建、表达及其多克隆抗体制备. 李杰,张星星,郭晶,孟庆玲,乔军,张国武,王晓婷,李妍,才学鹏. 2018
[2]布鲁氏菌Omp19基因的生物信息学分析、克隆表达和ELISA方法的初步建立. 杨宁宁,王震,杨亚军,张倩,宋胜男,张欢,陈创夫,刘明军. 2020
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