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美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒GP4蛋白中和活性单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 刘梦莹 1 ; 李敏华 2 ; 王倩 3 ; 田志军; 周伦江;

作者机构： 1.福建农林大学动物科学学院

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点猪病实验室

3.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;单克隆抗体;GP4蛋白;表位;中和活性

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 6 期

页码： 641-644

摘要： 为制备具有中和活性的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的单克隆抗体(MAb)并鉴定其抗原表位,本研究利用PRRSV SD53株的超离病毒作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠并进行细胞融合.采用PRRSV SD53株和真核表达的PRRSV各结构蛋白作为检测抗原,应用间接免疫荧光试验(IFA)筛选到一株稳定分泌抗SD53株GP4蛋白的杂交瘤细胞株(LM26).抗体亚类鉴定其为IgG2a,轻链为κ链.原核表达一系列截短的GP4蛋白鉴定LM26的抗原表位结果显示,LM26识别的抗原表位序列为57VVLQDI62,此抗原表位在美洲型PRRSV中相对保守.病毒中和试验结果显示,MAb LM26仅针对PRRSV SD53株具有中和活性,中和效价最高为1∶50,对其它美洲株PRRSV均不具有中和活性.该MAb的制备为进一步研究PRRSV GP4蛋白的结构和功能奠定了基础.

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