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茄子RAPD分子标记体系的建立与优化

文献类型： 中文期刊

作者： 吴雪霞 1 ; 查丁石 1 ; 朱宗文 1 ; 金海军 1 ; 李贤 1 ;

作者机构： 1.上海市农业科学院园艺研究所上海市设施园艺技术重点实验室

关键词： 茄子;RAPD;体系优化

期刊名称： 江西农业学报

ISSN： 1001-8581

年卷期： 2011 年 23 卷 06 期

页码： 55-57

摘要： 采用改良的CTAB法提取茄子基因组DNA,并通过单因素多水平梯度试验,比较筛选RAPD扩增体系的各影响因素,建立了茄子RAPD-PCR的最佳反应体系:20μL反应体系其中含25 mmol/L MgCl2 2.0μL1、0×PCR Buffer 2.0μL、10mmol/L dNTP 0.5μL5、U/μL Taq E 0.2μL0、.1μmol/L Primer 3μL1、0 ng/L模板DNA 3μL、灭菌双蒸水9.3μL。扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,37℃退火1 min7,2℃延伸1.5 min4,5个循环;72℃延伸10 min后4℃保存。

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