文献类型： 中文期刊

作者： 李彬 ¹ ; 刘浩飞 ² ; 孙冰 ² ; 茅爱华 ² ; 杜露平 ² ; 何孔旺 ² ; 郭容利 ² ; 温立斌 ² ; 张雪寒 ² ; 倪艳秀 ² ; 周俊明 ² ; 吕立新 ² ; 俞正玉 ² ; 王小敏 ² ; 胡屹屹 ² ; 祝昊丹 ² ; 于洋 ² ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

关键词： 猪流行性腹泻病毒;TaqMan荧光定量PCR;流行病学调查

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2014 年 30 卷 01 期

页码： 125-129

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为定量检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),建立了检测PEDV的TaqMan荧光定量PCR方法。根据PEDV基因组中保守的N基因序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有N基因的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。结果表明,该试验建立的荧光定量PCR方法在1μl 101~109拷贝之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.99以上,扩增效率在90%与100%之间。该方法的检测灵敏度为10拷贝,与常规RT-PCR方法相比,该方法敏感性更高,而且该检测方法特异性较好,与猪的其他病毒核酸均无交叉反应,批内和批间的变异系数均低于3%,表明该方法的重复性较好。对华东地区采集的130份临床样品进行检测,结果显示,PEDV的阳性率为63.1%。