文献类型： 中文期刊

作者： 刘成 ¹ ; 铃木孝子 ² ; 佐久间俊 ³ ; 宋健民 ¹ ; 李豪圣 ¹ ; 刘爱峰 ¹ ; 曹新有 ¹ ; 韩冉 ¹ ; 宫文萍 ¹ ; 刘建军 ¹ ; 小松田隆夫 ³ ;

作者机构： 1.山东省农业科学院作物研究所/农业部黄淮北部小麦生物学与遗传育种重点实验室/小麦玉米国家工程实验室

2.北海道中央农业试验站

3.日本国立农业生物资源研究所

关键词： 小麦黄花叶病毒;两步法qPCR;酶联免疫吸附剂测定法

期刊名称： 山东农业科学

ISSN： 1001-4942

年卷期： 2016 年 48 卷 07 期

页码： 118-124+132

摘要： 小麦黄花叶病毒病是其常发病,常造成严重减产。为建立可用于定量检测小麦黄花叶病毒(WYMV)拷贝数的q PCR方法,本研究对不同来源的WYMV小种序列进行比对分析,在序列保守区域设计引物11对,对其退火温度进行优化,进而建立各引物的q PCR标准曲线。结果发现,11对引物的扩增效率在50.60%~116.04%之间,仅2对引物可用于后续研究,扩增效率分别为97.21%(WY-05和WY-06)和91.85%(WY-F2和WY-R2)。利用其中的WY-F2和WY-R2对高抗和高感WYMV的小麦品种进行分析,结果显示,抗感小麦品种WYMV拷贝数差异极显著。对抗感分离群体266个单株进行分析,发现该q PCR方法灵敏度显著高于酶联免疫吸附剂测定法,更适用于抗感杂交分离群体的表型鉴定,因而可以用于抗WYMV基因的遗传定位与图位克隆工作。