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利用颗粒细胞筛选绵羊VEGFR有效干扰片段的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 邹云龙 1 ; 石国庆 2 ; 阿依木古丽 2 ; 张国华 2 ; 周平 2 ; 杨具田 2 ; 徐红伟 2 ; 曹忻 3 ;

作者机构: 1.西北民族大学生命科学与工程学院;新疆农垦科学院畜牧兽医研究所;西北民族大学实验中心

2.;西北民族大学生命科学与工程学院;新疆农垦科学院畜牧兽医研究所;西北民族大学实验中心

3.;西北民族大学生命科学与工程学院;新疆农垦科学院畜牧兽医研究所;西北民族大学实验中心;

关键词: 血管内皮生长因子(VEGF);血管内皮生长因子受体(VEGFR);RNA干涉;颗粒细胞;绵羊

期刊名称: 黑龙江畜牧兽医

ISSN: 1004-7034

年卷期: 2017 年 13 期

页码: 10-15+291

收录情况: 北大核心

摘要: 为了进一步探究血管内皮生长因子(VEGF)对绵羊卵母细胞成熟和胚胎发育的作用,试验采用电穿孔技术(Electroporation)将针对血管内皮生长因子受体(VEGFR)中的两个受体FLT1和KDR/FLK-1设计的6条双链小RNA导入到绵羊颗粒细胞内,通过实时定量PCR检测FLT1和KDR/FLK-1表达量的变化,筛选出针对VEGFR的有效干扰片段。结果表明:试验组F2(FLT1-siRNA-2)第1~3天的FLT1 mRNA相对表达量分别为7.17×10~(-6)±4.97×10~(-8)、5.92×10~(-6)±4.73×10~(-8)和1.14×10~(-5)±2.84×10~(-7),极显著低于其他FLT1试验组(P<0.01),且FLT1 mRNA相对表达量相差100倍或10倍;试验组K1(KDR/FLK-1-siRNA-1)第1~3天KDR/FLK-1 mRNA相对表达量分别为1.46×10~(-7)±6.08×10~(-9)、2.80×10~(-7)±1.82×10~(-8)和7.99×10~(-7)±2.60×10~(-8),极显著低于其他KDR/FLK-1试验组(P<0.01),且KDR/FLK-1 mRNA相对表达量相差100倍或10倍。从第4天开始试验组F2 FLT1 mRNA相对表达量和试验组K1 KDR/FLK-1 mRNA相对表达量逐渐增加,到达第9天与其他组趋于相近。最终确定针对FLT1和KDR/FLK-1最有效的干扰片段分别是FLT1-siRNA-2和KDR/FLK-1-siRNA-1。

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