文献类型： 中文期刊

作者： 邱丽霞 ¹ ; 林秀 ¹ ; 曹忻 ¹ ; 杨华 ² ; 杨永林 ² ; 余乾 ² ; 张文喆 ² ;

作者机构： 1.西北民族大学生命科学与工程学院

2.新疆农垦科学院

关键词： 绵羊;GSTA2基因;克隆;生物信息学;真核表达载体

期刊名称： 中国草食动物科学

ISSN： 2095-3887

年卷期： 2024 年 002 期

页码： 1-9

摘要： 为阐明绵羊谷胱甘肽S转移酶α2（Glutathione S-transferase alpha 2,GSTA2）基因功能，利用牛GSTA2基因序列设计引物，提取绵羊皮肤组织总RNA，应用RT-PCR、基因克隆、生物信息学对GSTA2基因进行研究，构建真核表达载体，转染绵羊皮肤成纤维细胞，应用qPCR技术检测GSTA2基因的表达。结果表明，克隆到绵羊GSTA2基因672 bp编码区序列（GenBank登录号：OR440604.1），编码223个氨基酸，分子量为25.39 ku。氨基酸比对和系统进化树分析表明，绵羊与牛的GSTA2相似度最高，达87.39%。GSTA2的二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。构建的真核表达载体pcDNA3.1-GSTA2转染绵羊皮肤成纤维细胞后，GSTA2基因表达量极显著上调（P ＜0.001）。说明成功克隆了绵羊新基因GSTA2的CDS序列，并成功构建了其真核表达载体。