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猪胎儿成纤维细胞的分离与基因转染

文献类型： 中文期刊

作者： 于永生 1 ; 曹阳 1 ; 罗晓彤 1 ; 张立春 1 ; 金海国 1 ; 王晓阳 1 ;

作者机构： 1.吉林省农业科学院畜牧分院

关键词： 猪胎儿成纤维细胞;绿色荧光蛋白;基因转染;脂质体

期刊名称： 吉林农业科学

ISSN： 1003-8701

年卷期： 2014 年 04 期

页码： 52-55

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为利用核移植法获取转基因克隆猪提供供体细胞,体外分离培养猪胎儿成纤维细胞并进行了绿色荧光蛋白基因转染。首先采用组织块贴壁法分离培养猪胎儿成纤维细胞,绿色荧光蛋白表达载体以脂质法介导转染猪胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的细胞克隆,PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,利用荧光显微镜检测荧光蛋白的表达。结果表明,组织块贴壁后9 d可获取原代成纤维细胞,基因转染后利用G418筛选9 d即可获得转基因细胞,对转基因细胞进行传代,PCR检测显示荧光蛋白基因整合到细胞基因组中,荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白表达,为下一步通过核移植方法获得转基因猪提供了基础。

  • 相关文献

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[2]牛胎儿成纤维细胞的分离培养及转染线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因. 于永生,罗晓彤,张立春,朴庆林. 2011

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[4]莴苣叶绿体转化体系的初步建立. 林春晶,韦正乙,王云鹏,王月琳,邢少辰. 2014

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