文献类型： 中文期刊
作者： 杨文君 1 ; 余乃通 2 ; 张雨良 2 ; 王健华 2 ; 刘志昕 2 ;
作者机构： 1.雅安职业技术学院
2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所
关键词： 槟榔植原体;膜蛋白基因;原核表达;抗血清制备
期刊名称： 热带作物学报
ISSN： 1000-2561
年卷期： 2014 年 35 卷 11 期
页码： 2243-2248
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 根据实验室测得的槟榔植原体膜蛋白基因(Ac Pmp)序列设计1对特异引物mp-FP/mp-RP,以病样槟榔总DNA为模板扩增该Ac Pmp的编码区并连接到p MD19T simple中间载体。将测序正确的阳性菌提取质粒p MD19T-Ac Pmp,经NcoⅠ和XhoⅠ双酶切后回收Ac Pmp片段,然后以正确的编码框连接到原核表达载体p ET32a(+),转化Escherichia coli BL21感受态细胞。含有p ET32a-Ac Pmp的BL21表达菌经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表明,在30℃,0.1 mmol/L IPTG条件下诱导4 h,可产生部分可溶性的融合蛋白。利用Ni2+-NTA亲和层析柱法进行纯化并获得高纯度的可溶性融合蛋白。将纯化后的融合蛋白多次免疫家兔,取其抗血清,以融合蛋白(1∶10 000稀释)作抗原,间接ELISA法测定抗血清效价大于125 000。Western Blot杂交结果表明槟榔植原体膜蛋白抗血清能与融合蛋白特异性结合。
- 相关文献
[1]高粱花叶病毒外壳蛋白的原核表达及其抗血清制备. 王洪星,龚殿,孙玉娟,张雨良,王健华. 2014
[2]水稻瘤矮病毒S9基因的生物信息学分析及原核表达蛋白的抗血清制备. 赵芹,邓永枢,阮小蕾,李华平. 2010
[3]水稻瘤矮病毒S11基因沉默抑制子的原核表达及抗血清制备. 赵芹,沈文锦,张翼翔,刘福秀,李华平. 2010
[4]广东番茄黄化曲叶病毒AC2基因的原核表达及抗血清制备. 赵芹,李华平,何自福,佘小曼,谢大森,何晓明,彭庆务. 2011
[5]番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因原核表达蛋白的抗血清制备及其检测应用. 赵芹,李华平,谢大森,何晓明,张曙光,罗少波. 2012
[6]香蕉束顶病毒Haikou 2分离物DNA2编码框原核表达及抗血清制备. 谭老喜,王洪星,张雨良,王健华,章绍延,周朋,余乃通,刘志昕. 2012
[7]重组小麦静息巯基氧化酶的表达、酶学特性及其对面包品质的影响. 杜念,邓媛元,魏振承,张雁,唐小俊,李萍,周鹏飞,刘光,张名位. 2021
[8]非洲猪瘟病毒p72蛋白N末端的原核表达及间接ELISA检测方法的建立. 姜林林,宋帅,蔡汝健,蒋智勇,李艳,勾红潮,楚品品,李春玲. 2021
[9]黑芝麻多酚氧化酶的重组表达及其酶学特性. 叶彩燕,刘光,杜念,张瑞芬,刘磊,贾栩超,张名位. 2021
[10]1型鸭疫里默氏杆菌p25蛋白基因(p25)的克隆表达及免疫学活性. 齐冬梅,袁建丰,覃宗华,吴彩燕,谢明权. 2011
[11]柔嫩艾美耳球虫5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因的克隆、原核表达及酶活性分析. 廖申权,吴彩艳,戚南山,李娟,吕敏娜,张健騑,谢明权,孙铭飞. 2015
[12]绿色木霉TvALP-linker-TvRBL融合基因的构建与原核表达. 徐杨玉,温世杰,李海芬,李玲,梁炫强. 2015
[13]锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF59的克隆、分析及其主要B细胞表位区的原核表达. 柯浩,刘振兴,林敏,孟轩,陈棠堂. 2010
[14]柔嫩艾美耳球虫Cytbc1基因的克隆、序列分析及重组表达. 张晨旭,廖申权,戚南山,吴彩艳,李娟,吕敏娜,林栩慧,吴玄光,孙铭飞. 2016
[15]新型鸭腺病毒4型Fiber2蛋白的表达. 吕涵,黄允真,张春红,孙敏华,瞿孝云. 2023
[16]柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的克隆、序列分析与原核表达. 刘田,廖申权,戚南山,吴彩艳,李娟,吕敏娜,李国清,孙铭飞. 2014
[17]鸭腺病毒3型Fiber-2基因的克隆与原核表达. 邝瑞欢,张志宏,陈玫婷,刘通,方曦琳,陈修邓,陆巧芬,曹建伟,沈书文,温素彦,尹静莹,董嘉文. 2023
[18]巴西橡胶树HbCZF1的原核表达分析. 易红艳,郭冬,李辉亮,彭世清. 2014
[19]重组猪IFN-λ3原核表达及其活性分析. 周恒,沈海燕,郭鹏举,张春红,张建峰,刘志成,孙俊颖,李玉谷. 2015
[20]高粱花叶病毒外壳蛋白的原核表达及其抗血清制备. 龚殿,孙玉娟,张雨良,王健华,刘志昕. 2013
作者其他论文 更多>>
-
基于CRISPR/Cas9系统的拟南芥双链结合蛋白AtHyl1基因编辑
作者：吴坤鑫;张春微;刘志昕;余乃通;王健华;张秀春
关键词：CRISPR/Cas9;基因编辑;AtHyl1;拟南芥三突变体hyl1dcl2drb4
-
香蕉条斑病毒ORF Ⅰ基因克隆及编码蛋白和同源物的生物信息学分析
作者：黎维丽;余乃通;李俊成;王健华;李宾宾;刘志昕
关键词：香蕉条斑病毒;ORFⅠ;同源蛋白;生物信息学分析
-
CRISPR/Cas9系统在植物育种中的应用
作者：张余;张雨良
关键词：CRISPR/Cas9原理;基因编辑;编辑效率;作物改良
-
转基因番木瓜55-1品系的环介导等温扩增检测方法的建立
作者：夏启玉;李美英;肖苏生;贺萍萍;杨小亮;张雨良;郭安平
关键词：转基因番木瓜55-1;环介导等温扩增;特异性检测
-
利用CRISPR/Cas9系统编辑拟南芥2个双链结合蛋白
作者：武亚丹;张春微;刘志昕;王健华;余乃通;张秀春
关键词：CRISPR/Cas9;基因编辑;拟南芥;双链结合蛋白
-
仙人掌总RNA提取方法的改进与分析
作者：周启林;罗志文;胡福初;张治礼;刘志昕
关键词：仙人掌;RNA提取;RT-PCR;灵敏度检测
-
本生烟瞬时表达系统快速检测RNAi载体沉默效果
作者：武亚丹;张秀春;冼淑丽;余乃通;王健华;刘志昕
关键词：本生烟;瞬时表达;干扰载体;半定量RT-PCR;沉默效果检测
