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鱼源嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS在枯草芽胞杆菌中的表达及检测

文献类型： 中文期刊

作者： 罗晓松 1 ; 侯化鹏 1 ; 尚书 1 ; 汪登强 2 ; 邹世平 1 ; 龙良启 1 ;

作者机构： 1.华中农业大学动物医学院

2.中国水产科学研究院长江水产研究所

关键词： P43启动子;pNW33N穿梭载体;绿色荧光蛋白;外膜蛋白;嗜水气单胞菌;枯草芽胞杆菌

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 04 期

页码： 12-18

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用PCR方法从枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)、鱼源嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的基因组DNA和质粒pGFP-2中,分别扩增P43启动子、不含信号肽的外膜蛋白基因ompTS和不含启动子的绿色荧光蛋白基因。各PCR产物经测序、酶切、连接到大肠杆菌(Escherichia coli)-枯草芽胞杆菌穿梭载体pNW33N相应位点分别构建了穿梭表达载体pNWP43gfp和pN-WP43omp。电转枯草芽胞杆菌构建菌株BS01(pNWP43gfp),在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光;电转枯草芽胞杆菌构建菌株BS01(pNWP43omp),表达的外膜蛋白经SDS-PAGE和Westernblot检测,结果表明,穿梭表达载体pNWP43gfp和pNWP43omp构建成功。构建的枯草芽胞杆菌在P43启动子的调控下,分别实现了绿色荧光蛋白基因和外膜蛋白基因ompTS的表达。

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