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猪肺炎支原体P97 TaqMan-BHQ荧光定量PCR检测方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

作者: 武昱孜 1 ; 靳蒙蒙 1 ; 白方方 1 ; 张旭 1 ; 华利忠 1 ; 雷治海 1 ; 邵国青 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院

关键词: 猪肺炎支原体;P97基因;荧光定量PCR;TaqMan-BHQ探针

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2012 年 12 期

页码: 1268-1272

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据猪肺炎支原体(Mhp)P97基因的保守序列设计合成了引物和TaqMan-BHQ探针,建立了快速检测Mhp的TaqMan-BHQ荧光定量PCR方法。结果显示,该方法特异性良好,与其他病原不发生交叉反应;最低检测限可达10copies/μL,敏感性高;不同梯度定量模板的拷贝数的对数值与Ct值之间的线性关系表达式为Ct=-3.426×lg(conc)+43.343,有良好的线性关系,标准曲线的相关系数为0.997,扩增效率为95.85%,重复性良好。对江苏省某猪场的48份猪肺组织进行荧光定量PCR检测,结果有43份肺组织呈现阳性,阳性检出率为89.58%,比巢式PCR的敏感性高。表明,该检测方法能用于Mhp的快速检测,可对猪支原体肺炎的早期诊断和流行病学调查提供新的技术手段。

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