文献类型： 中文期刊
作者： 谭老喜 1 ; 张雨良 2 ; 周朋 2 ; 章绍延 2 ; 王健华 2 ; 张秀春 2 ; 刘志昕 2 ;
作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所
2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所,农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室;海南大学环境与植物保护学院
关键词： 香蕉束顶病毒;香蕉叶片;酵母双杂交cDNA文库
期刊名称： 植物研究
ISSN： 1673-5102
年卷期： 2013 年 33 卷 06 期
页码： 75-79
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了研究香蕉束顶病毒与香蕉寄主致病的互作分子机制,本文报道利用Make Your Own"Mate&PlateTM"Library System试剂盒成功构建感染BBTV香蕉叶片的cDNA文库。通过改良CTAB法提取感染BBTV香蕉叶片的总RNA,采用SMART法反转录合成双链cDNA,经SfiI酶切并去除短片段之后,与经同样酶切的pGADT7-SfiI载体连接,利用电转法将重组载体转化到大肠杆菌宿主细胞中,获得初级cDNA文库,最后以初级文库100万克隆为基数扩增,得到扩增文库并提取质粒。结果得到库容量大于2.0×106的初级文库,检测表明文库cDNA插入片段长度主要分布在700~2 000 bp,文库重组率为87.5%。结果表明,该文库质量较好,可用于后续酵母双杂交互作蛋白筛选试验,本研究为开展病毒与寄主互作的研究奠定基础。
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