文献类型： 中文期刊

作者： 张悦 ¹ ; 高晓建 ¹ ; 叶金明 ¹ ; 陈楠 ¹ ; 杜雪地 ¹ ; 张晓君 ¹ ; 邴旭文 ¹ ;

作者机构： 1.扬州大学动物科学与技术学院;扬州市水产生产技术指导站;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

关键词： 翘嘴鳜;嗜水气单胞菌;aer A基因;环介导等温扩增(LAMP)

期刊名称： 水生生物学报

ISSN： 1000-3207

年卷期： 2017 年 06 期

页码： 1225-1231

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是一种危害鳜鱼养殖生产的重要病原细菌,为进一步明确该病原菌的分子特征及建立快速检测技术,实验对引起翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)暴发性死亡的病原嗜水气单胞菌进行了致病性、菌株毒力特征研究,同时以嗜水气单胞菌气溶素基因aer A为分子靶标设计引物,利用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立了病原嗜水气单胞菌的快速检测方法。结果表明,本次引起翘嘴鳜暴发性死亡的病原嗜水气单胞菌半致死浓度为1.6×10~6 CFU/m L,携带aer A等14种毒力基因,此14种毒力基因可用于其致病性分析及分子检测。以气溶素基因aer A设计引物进行的环介导恒温扩增,结果显示可扩增出阶梯状条带,加入SYBR Green I染色后呈现绿色的阳性反应,而对照组均未出现任何扩增条带且反应体系呈现橙色,表明LAMP检测方法对于嗜水气单胞菌检测具有很好的特异性;灵敏度检测的最低检测限为4.6×10~1 CFU/m L;10种经人工感染的淡水养殖鱼虾组织匀浆增菌液,提取DNA后进行LAMP方法检测,结果均可获得阳性扩增结果,而对照未染菌组呈阴性,表明该方法具有较好的应用性,可应用于嗜水气单胞菌引起的水生动物疾病的检测。