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脱羰秋水仙碱(DM)辅助去牛卵母细胞核的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 李向臣 1 ; 吴月红 1 ; 马毅 2 ; 山灵 1 ; 张涌 1 ;

作者机构： 1.西北农林科技大学生物工程研究所

2.天津市畜牧兽医研究所

关键词： 牛;显示去核;脱羰秋水仙碱(Demecolcine,DM);核移植;卵母细胞

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2007 年 38 卷 06 期

页码： 537-541

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 受体细胞去核是核移植关键步骤之一。利用脱羰秋水酰碱(Demecolcine,DM)显示牛卵母细胞染色体的位置进行去核,主要从以下几个方面进行了试验:卵母细胞在DM中孵育浓度、卵母细胞在DM中孵育时间及卵母细胞成熟时间对显示效果的影响。结果表明:(1)成熟牛卵母细胞用离子霉素激活5 min,DM孵育2 h完全诱导去核,结果没有见到完全去核的卵母细胞;(2)挑选有第一极体的成熟牛卵母细胞,在浓度为0.5μg/mL的DM中孵育2 h显示率可达76.54%;(3)牛卵母细胞在成熟18 h可以获得73.86%的显示效果。(4)在没有去卵丘细胞的卵母细胞中添加DM取得了更好的显示效果(80.82%),囊胚的发育率也较其它组高,可达18.60%,说明未去卵丘细胞的卵母细胞添加DM更有利于显示染色体的位置,而且更有利于囊胚的发育。利用DM显示染色体的位置不仅可以高效快速的去核,同时也避免了传统去核时荧光对卵母细胞的照射。

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