文献类型： 中文期刊
作者： 李庆勇 1 ; 可小丽 1 ; 卢迈新 1 ; 朱华平 1 ; 高风英 1 ; 刘志刚 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院
关键词： 罗非鱼;无乳链球菌;C5a肽酶;原核表达;免疫原性
期刊名称： 中国水产科学
ISSN： 1005-8737
年卷期： 2014 年 21 卷 01 期
页码： 169-179
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)为鱼体样本,克隆了罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)scpB基因,构建了原核表达质粒pET32a(+)-scpB,转入大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导表达,表达的重组蛋白经镍离子金属螯合柱纯化及超滤管浓缩后,进行SDS-PAGE和Western blot分析鉴定。纯化的重组蛋白以不同剂量(1μg/g、3μg/g、5μg/g)免疫尼罗罗非鱼后,每周检测各实验组鱼体血清非特异性免疫指标[溶菌酶活性、超氧化物歧化酶(SOD)活力]及抗体水平变化情况,并于免疫4周后以4倍LD50的剂量对其进行人工攻毒。结果显示,该重组蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式存在;对尼罗罗非鱼的相对免疫保护率为69.66%~89.00%,其中5μg/g组的相对保护率最高;受免鱼体血清中溶菌酶活性、SOD活力和抗体水平较对照组有极显著提高(P<0.01),结果表明,重组蛋白ScpB具有较强的免疫原性和保护作用。本研究旨在为GBS多肽疫苗的研制奠定基础。
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