文献类型： 中文期刊

作者： 王晶 ¹ ; 王耀 ² ; 王方雨 ¹ ; 邓瑞广 ¹ ; 胡骁飞 ¹ ; 余秋颖 ¹ ; 郝俊芳 ¹ ; 邢云瑞 ¹ ; 侯玉泽 ² ;

作者机构： 1.河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室

2.河南科技大学食品与生物工程学院

关键词： 草甘膦;人工抗原;多抗;酶联免疫吸附检测

期刊名称： 食品科学

ISSN： 1002-6630

年卷期： 2017 年 38 卷 04 期

页码： 65-69

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride,EDC)法和戊二醛(glutaraldehyde,GA)法,合成了草甘膦(N-(phosphonomethyl)glycine,PMG)人工抗原,通过免疫制备高敏感性、特异性的兔PMG多克隆抗血清并进行鉴定。将PMG分别与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)偶联,合成免疫抗原PMG-BSA和包被抗原PMG-OVA。经紫外扫描、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定后,免疫新西兰大白兔,制备多抗。利用间接酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定多抗效价,间接竞争ELISA方法测定血清的敏感性和特异性。结果表明,免疫的3只兔血清效价均达1∶104以上,2号兔多抗效果最好,半数抑制浓度(IC50)为30.9μg/m L,且具备良好的特异性。本实验成功合成了PMG人工抗原,并制得了敏感性高、特异性好的兔多抗,为PMG的免疫学快速检测方法的提供参考。