文献类型： 中文期刊

作者： 张家庆 ¹ ; 沈开元 ² ; 孙如玉 ³ ; 胡湘云 ³ ; 刘明君 ³ ; 刘征 ³ ; 李仕彦 ³ ; 张冰 ³ ; 吕玲燕 ³ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院畜牧研究所

2.柳州市人民医院

3.广西农业职业技术大学

关键词： 阿戈美拉汀;猪;卵母细胞;手工克隆胚胎;发育潜能

期刊名称： 中国畜禽种业

ISSN： 1673-4556

年卷期： 2025 年 21 卷 002 期

页码： 7-16

摘要： 该试验在猪卵母细胞体外成熟的前20~22 h培养过程中添加10-11、10-10、10-9和10-8mol/L的阿戈美拉汀,不添加阿戈美拉汀的作为对照组,对猪卵巢中收集到的卵母细胞进行体外培养.卵母细胞体外成熟后,利用2',7'-二氯双氢荧光素二乙酸酯(DCHF-DA)染色方法检测卵母细胞中活性氧水平,采用绿色荧光素标记花生凝集素(FITC-PNA)染色方法检测卵母细胞中皮质颗粒分布情况;手工克隆重构胚激活后在第2天统计卵裂率、第7天统计囊胚发育率和囊胚细胞总数,采用实时荧光定量PCR法检测囊胚中多能性基因表达情况.结果表明:与对照组相比,添加10-11、10-10mol/L的阿戈美拉汀能显著降低卵母细胞内活性氧水平(P<0.05),且10-10mol/L的阿戈美拉汀显著促进了卵母细胞皮质颗粒分布类型Ⅰ比例(P<0.05).10-11、10-10mol/L浓度的阿戈美拉汀添加都可以促进徒手克隆胚胎的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数,但10-10mol/L浓度下促进效果显著(P<0.05),据此确定猪卵母细胞体外成熟液中添加阿戈美拉汀浓度为10-10mol/L.定量PCR结果显示,阿戈美拉汀组囊胚细胞中多能性基因NANOG、POU5F1、SOX2的mRNA的表达量均显著高于对照组(P<0.05).可见,猪卵母细胞体外成熟液中添加10-10mol/L的阿戈美拉汀可提高卵母细胞的体外成熟质量,改善克隆胚胎的体外发育潜能.