文献类型： 中文期刊

作者： 吴曙限 ¹ ; 孙健 ¹ ; 刘西梅 ² ; 刘中华 ³ ; 孙世铎 ¹ ; 乔宪凤 ² ; 肖红卫 ² ; 郑新民 ² ;

作者机构： 1.西北农林科技大学动物科技学院

2.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/湖北省动物胚胎工程及分子育种重点实验室

3.西北农林科技大学动物医学院

关键词： 绿色荧光蛋白基因;小鼠胚胎成纤维细胞;分离;培养

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2009 年 41 卷 12 期

页码： 63-65

收录情况： 北大核心

摘要： 研究了不同胎龄、消化液、培养液对转绿色荧光蛋白(GFP)基因小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)分离和培养的影响,并对其生长形态进行观察。结果表明,在实验室条件下,12.5～14.5d胎龄的GFP-MEF分离效果最好,0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA所用时间短,消化后培养细胞贴壁率高;GFP-MEF形态以小梭形为主,呈漩涡状、鱼群状生长;最佳培养液为DMEM添加10%胎牛血清。研究获得了实验室分离制备GFP-MEF的方法,为制作饲养层和进一步构建转基因动物奠定基础。