文献类型： 中文期刊

作者： 朱喆 ¹ ; 张剑英 ¹ ; 华再东 ¹ ; 任红艳 ¹ ; 肖红卫 ¹ ; 张立苹 ¹ ; 郑新民 ¹ ; 毕延震 ¹ ; 卢晟盛 ¹ ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程与分子育种湖北省重点实验室;广西大学动物科学技术学院

关键词： 猪;肌抑素(MSTN);基质金属蛋白酶2/7/9(MMP-2/7/9);PK15细胞

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2020 年 02 期

页码： 345-351

收录情况： 北大核心

摘要： 本研究旨在揭示肌抑素(MSTN)与基质金属蛋白酶(MMPs)的调控关系,探明MSTN对PK15细胞MMP-2/7/9表达的影响。对MSTN单等位基因敲除猪背膘组织进行转录组测序分析,复苏前期制备的MSTN基因敲除PK15细胞系:单等位基因敲除的PK3108细胞系和双等位基因敲除的L18细胞系,通过实时荧光定量PCR和Wesrern blotting分别检测PK15、PK3108和L18细胞系中MSTN、MMP-2/7/9基因的mRNA和蛋白表达水平。结果发现,与野生型猪相比,MSTN单等位基因敲除猪背膘组织转录因子C/EBPδ、MMP-2/7基因mRNA表达量均极显著下调(P<0.01);细胞外基质中纤连蛋白(FN)和层连接蛋白(LN)含量均极显著增加(P<0.01)。复苏的PK3108和L18细胞呈现绿色荧光。实时荧光定量PCR结果显示,PK3108和L18细胞中MSTN、MMP-2/7/9的mRNA表达量均极显著低于PK15细胞(P<0.01);Western blotting结果显示,PK3108和L18细胞中MSTN、MMP-2/7/9的蛋白表达量均明显低于PK15细胞。本研究结果表明,在MSTN基因敲除的PK15细胞中,MSTN功能缺失能显著降低MMP-2/7/9的表达,且MMP-2/7/9蛋白表达降低的趋势与MSTN蛋白表达的趋势相一致。