文献类型： 中文期刊
作者： 罗安凤 1 ; 华再东 2 ; 杨彩侠 1 ; 陈矾 2 ;
作者机构： 1.长江大学动物科学技术学院
2.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： 小鼠卵母细胞;Nup98;Rae1;体外成熟;减数分裂
期刊名称： 中国畜牧兽医
ISSN： 1671-7236
年卷期： 2024 年 005 期
页码： 1998-2006
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 【目的】探究核膜孔蛋白98（Nup98）和核糖核酸输出因子1（Rae1）对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟的影响。【方法】选择4周龄SPF级雌性昆明小鼠，分离小鼠卵母细胞并进行体外成熟培养，利用实时荧光定量PCR检测小鼠卵母细胞中Nup98和Rae1基因表达量；利用免疫荧光法检测Nup98和Rae1共定位情况；利用电转siRNA干扰技术敲低小鼠卵母细胞中Nup98和Rae1基因，通过实时荧光定量PCR检测干扰效率，并观察小鼠卵母细胞生发泡破裂（germinal vesicle breakdown, GVBD）和第一极体排出（first polar body extruction, PBE）情况；利用免疫荧光法检测敲低Nup98和Rae1基因后小鼠卵母细胞纺锤体组装和染色体排列情况；利用染色体爬片技术检测染色体非整倍体率。【结果】Nup98和Rae1基因在小鼠卵母细胞中均有表达。在小鼠卵母细胞生发泡（germinal vesicle, GV）时期，Nup98和Rae1共定位于核膜边缘；在减数分裂过程中，Nup98和Rae1聚集于染色体动粒上。siRNA干扰试验结果显示，与对照组相比，单独敲低Nup98和Rae1基因后，对另一基因表达无显著影响（P＜0.05）;双敲Nup98和Rae1基因后，对卵母细胞减数分裂恢复率无显著影响（P＞0.05）,小鼠卵母细胞发育9.5 h时的PBE率极显著升高（P＜0.01）,染色体分离比率和非整倍体率极显著或显著增加（P＜0.01;P＜0.05）。【结论】Nup98和Rae1基因在小鼠卵母细胞减数分裂中参与染色体分离，影响非整倍体的发生，从而影响受精胚胎的发育潜力。
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