文献类型： 中文期刊
作者： 闫婷 1 ; 刘天奇 1 ; 佟广香 1 ; 徐欢 1 ; 张婷婷 1 ; 匡友谊 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
关键词： 斑马鱼;成骨细胞;细胞系
期刊名称： 水产学杂志
ISSN： 1005-3832
年卷期： 2024 年 37 卷 006 期
页码： 45-52
摘要： 为建立斑马鱼（Danio rerio）成骨细胞系，将4月龄斑马鱼脊椎剪成2～3 mm3的组织块，置于含有鲤（Cyprinus carpio）血清、表皮细胞生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、L-谷氨酰胺及胎牛血清的M-199培养基中，28℃下用组织块贴壁培养法进行原代成骨细胞培养，用染色体核型鉴定、胞外基质蛋白检测、基因表达及流式RNA原位杂交（RNA-FISH）分析鉴定成骨细胞系。结果显示：已成功构建斑马鱼脊椎成骨细胞系，并传代至40代，生长迅速稳定，复苏状态良好。细胞系中期分裂相的染色体数目2n=50，核型公式（2n=10m+30sm+10st,NF=90），与斑马鱼染色体核型一致。斑马鱼成骨细胞碱性磷酸酶、茜素红矿化结节染色及von Kossa氏矿化结节法染色均呈阳性。鱼骨钙素含量为47 619 ng/L。细胞系中成骨细胞发育标志基因runx2a、bglapl和alp的表达量显著高于斑马鱼肌肉组织。流式RNA-FISH检测结果表明，98%以上的成骨细胞均表达sp7。结论：本研究成功建立了斑马鱼脊椎成骨细胞系，可为骨骼发育及骨相关疾病的机制研究提供体外研究的实验材料。
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