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猪CD205分子CysR-FN Ⅱ蛋白特异性纳米抗体的筛选与鉴定研究

文献类型: 中文期刊

作者: 孙鑫 1 ; 杨利 1 ; 郭东辉 2 ; 马旭东 3 ; 杜露平 1 ; 侯立婷 1 ; 陈瑾 1 ; 冯秀丽 4 ; 郑其升 1 ; 程海卫 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院动物免疫工程研究所/国家兽用生物制品工程技术研究中心/江苏省食品质量与安全重点实验室

2.河南祺祥生物科技有限公司

3.中国热带农业科学院

4.南京农业大学动物医学院

关键词: 猪;CD205;CysR-FNⅡ;纳米抗体;噬菌体展示

期刊名称: 南京农业大学学报

ISSN: 1000-2030

年卷期: 2024 年 47 卷 005 期

页码: 941-947

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: [目的]猪CD205分子作为猪树突状细胞(DC)特异性的抗原提呈受体,在抗原提呈过程中起关键作用。本研究通过噬菌体展示技术针对猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白进行筛选以获得其特异性的纳米抗体,为猪CD205靶向抗原提呈研究奠定基础。[方法]利用前期制备的猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白进行羊驼免疫,经6次皮下免疫后采集羊驼外周血淋巴细胞,提取总RNA后反转录获得cDNA,经PCR扩增编码纳米抗体的基因片段,构建猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白噬菌体展示纳米抗体基因文库,再运用噬菌体展示技术针对猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白进行亲和筛选,随机挑选单克隆菌落并使用Phage-ELISA方法鉴定出针对猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白的特异性纳米抗体。[结果]4轮亲和筛选后,通过Phage-ELISA方法鉴定和序列比对分析,共成功获得12个猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白特异性纳米抗体,其相对分子质量约为17×10~3。[结论]本研究成功筛选并获得猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白特异性的纳米抗体。

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