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温郁金SRAP-PCR反应体系建立及条件优化

文献类型： 中文期刊

作者： 王晓慧 1 ; 吴亮 2 ; 姜程曦 2 ;

作者机构： 1.吉林省农业科学院农业资源与环境研究所

2.温州医科大学药学院

关键词： 温郁金;基因组DNA;SRAP-PCR反应体系;SRAP分子标记;遗传多样性

期刊名称： 中草药

ISSN： 0253-2670

年卷期： 2016 年 47 卷 14 期

页码： 2515-2518

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的研究温郁金Curcuma wenyujin的SRAP-PCR扩增体系最适宜的条件。方法以提取纯化温郁金基因组DNA为模板,利用PCR扩增技术,对SRAP反应中主要影响因素Mg2+浓度、d NTP浓度、模板DNA质量浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度进行优化。结果根据实验确定的最佳体系为25μL SRAP反应体系,其中Mg2+2.0 mmol/L,Taq聚合酶2.0 U,引物浓度1.6μmol/L,模板DNA 0.4 ng/μL,d NTP 2.0 mmol/L,10×PCR缓冲液2.5μL。结论通过扩增条件优化实验,扩增的产物条带清晰明亮、重复性好,确定的反应体系及反应程序适用于温郁金的SRAP分子标记,为今后温郁金的遗传多样性研究奠定了基础。

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