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运用噬菌体随机肽库筛选与DON毒素特异结合的亲和肽段

文献类型： 中文期刊

作者： 邢锦城 1 ; 张旭 2 ; 马鸿翔 3 ; 徐海 1 ; 侯继波 4 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院

2.江苏省农业生物学重点实验室

3.江苏沿海地区农业科学研究所

4.国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON);噬菌体展示随机肽库;酶联免疫检测;小麦赤霉病

期刊名称： 植物保护学报

ISSN： 0577-7518

年卷期： 2015 年 42 卷 02 期

页码： 194-200

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得与毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)高亲和力的特异性多肽,利用丁基硼酸封闭法制备DON人工抗原DON-HG-BSA,以其为靶分子筛选噬菌体肽库,对阳性克隆进行DNA序列测定与氨基酸推导,并进行亲和特异性验证。结果显示,经过4轮亲和肽段筛选与酶联免疫检测法鉴定,从M13噬菌体随机7肽库中得到15个DON人工抗原包被孔与牛血清白蛋白包被孔OD比值大于3.8的阳性克隆,其中10个与DON人工抗原高亲和力结合的阳性克隆经测序后共推导出4种多肽序列。经抗原梯度酶联免疫检测法验证,多肽MAPGWVP与DON人工抗原浓度的相关性高达0.99,对人工抗原具有高亲和力。该多肽的获得将为进一步开发高效的DON诊断试剂盒奠定基础。

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