文献类型: 中文期刊
作者: 古小莉 1 ; 李永贤 1 ; 李惠青 1 ; 陈洁文 1 ; 李刘冬 1 ;
作者机构: 1.中国水产科学研究院南海水产研究所农业部水产品加工重点实验室农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室
关键词: 创伤弧菌;外膜蛋白;多克隆抗体;Western Blot;ELISA
期刊名称: 中国渔业质量与标准
ISSN: 2095-1833
年卷期: 2017 年 05 期
页码: 45-50
摘要: [目的]制备创伤弧菌特异性抗体,为建立免疫学快速检测创伤弧菌提供参考依据。[方法]以创伤弧菌外膜蛋白作为抗原,将抗原分多次免疫新西兰大白兔获得特异性多克隆抗体,采用蛋白G亲和层析法纯化多克隆抗体,通过间接ELISA和Western Blot测定创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体的效价、敏感性和特异性。[结果]实验获得了纯度较高的创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体,效价为1∶64 000;抗体对创伤弧菌具有高的特异性,它与多株致病菌均无明显交叉反应,其对创伤弧菌检测灵敏度为103CFU/m L;Western Blot分析表明,制备的多克隆抗体能识别创伤弧菌外膜蛋白,创伤弧菌外膜蛋白具较强的抗原性。[结论]创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体具有较高特异性和灵敏性,可应用于创伤弧菌的快速、灵敏的免疫学检测。
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