文献类型: 中文期刊
作者: 黄丽丽 1 ; 林裕胜 2 ; 江锦秀 2 ; 张靖鹏 2 ; 游伟 2 ; 肖义军 1 ; 胡奇林 2 ;
作者机构: 1.福建师范大学生命科学学院
2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词: 伪结核棒状杆菌;山羊;耐药性;分离;鉴定
期刊名称: 福建农业学报
ISSN: 1008-0384
年卷期: 2019 年 008 期
页码: 925-932
收录情况: CSCD
摘要: [目的]分离、鉴定福建省某养殖场病死山羊的病原,明确山羊病死原因,为山羊伪结核棒状杆菌病的防治提供科学依据.[方法]以无菌采集的病羊肺脏为材料,进行细菌分离纯化,鉴定分离菌株的形态特征及培养特性;提取菌株DNA,利用特异性引物和16S rRNA通用引物进行PCR,16S rRNA扩增片段送公司进行克隆测序并对序列进行分析;并进行生化、药敏和动物攻毒试验.[结果]该分离菌株在含10%脱纤维绵羊血的琼脂培养基上,生长成直径1 mm左右、中央凸起、乳白色、边缘不整齐、伴有β溶血环的菌落,在营养琼脂培养基上生长不良,在麦康凯琼脂培养基上不能生长.16S rRNA测序结果经NCBI在线软件Blast后显示与GenBank上的伪结核棒状杆菌的同源性高达100%;山羊伪结核棒状杆菌特异性PCR有目的扩增条带;生化试验结果与伯杰氏细菌鉴定手册中伪结核棒状杆菌相符,表明分离菌为山羊伪结核棒状杆菌,命名为FJ-PN.小鼠攻毒试验结果显示,小鼠腹腔与皮下注射0.3 mL含量为4*105CFU·mL-1的分离菌,在40 h内全部死亡;山羊攻毒试验结果显示,山羊经皮下注射2 mL、鼻腔接种1 mL含量为4*105CFU·mL-1的分离菌3 d后死亡.药敏试验结果显示该菌对克拉霉素、环丙沙星、青霉素、四环素、左氟沙星、氧氟沙星、庆大霉素高度敏感,对红霉素、氯霉素、氨苄西林、头孢噻肟、头孢西丁、利福平低度敏感,对链霉素、甲氧苄啶表现耐药.[结论]本研究分离到的1株细菌为山羊伪结核棒状杆菌,具有较强的致病性,且对抗生素表现出一定的耐药性,为该病的诊断和合理用药提供了理论支持.
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