文献类型： 中文期刊

作者： 朱春华 ¹ ; 刘荭 ² ; 刘晓东 ¹ ; 杨金先 ¹ ; 郑在予 ¹ ; 林天龙 ¹ ;

作者机构： 1.福建省农业科学院生物技术研究所

2.深圳出入境检验检疫局

关键词： 中华鳖;虹彩病毒;单克隆抗体;抗原

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2009 年 33 卷 05 期

页码： 130-136

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以纯化的中华鳖虹彩病毒为抗原免疫Balb/C小鼠,取免疫鼠脾细胞经杂交融合获得了8个能稳定分泌抗中华鳖虹彩病毒特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。单克隆抗体亚级份分析结果表明,M ab2A4属IgA,M ab8E1是IgG2a,其他的6株单抗M ab1D3、M ab2H1、M ab3A1、M ab4B5、M ab5E1和M ab6F2均为IgG1。酶联免疫吸附剂测定(ELISA)分析表明,8株单抗均能特异性地识别中华鳖虹彩病毒,与EPC、CO、FHM等宿主细胞不产生交叉反应,腹水抗体的ELISA效价在105~106。IFA分析表明,8株单抗中仅M ab5E1没有免疫荧光反应特性,其余7株单抗均能对染毒病灶产生特异性的荧光染色。中和试验结果证实8株单抗均没有中和病毒的特性。应用W estern-blotting进行中华鳖虹彩病毒的抗原表位初步分析,结果显示:M ab1D3和M ab2A4分别识别分子量为84 ku和35 ku中华鳖虹彩病毒结构蛋白,M ab3A1能够同时识别分子量分别为14 ku和16 ku的两条多肽,说明这3株单抗结合位点是非构象依赖性抗原决定簇,其余单抗不具备W estern-blotting反应特性。这些结果提示上述单抗对中华鳖虹彩病毒抗原特异、灵敏,可用于中华鳖虹彩病毒的检测和结构蛋白分析。