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兔岩藻糖基转移酶基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 哲名家 1 ; 张淼涛 2 ; 云涛 3 ; 王玢瑸 4 ; 刘光清 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院上海兽医研究所

2.西北农林科技大学动物科技学院

3.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

4.西北农林科技大学动物医学院

关键词： 兔病毒性出血症病毒;岩藻糖基转移酶;原核表达

期刊名称： 西北农林科技大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-9387

年卷期： 2012 年 40 卷 04 期

页码： 21-24+30

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】克隆兔岩藻糖基转移酶(FUT2)基因,并进行原核表达,为进一步研究RHDV的感染过程和致病机理奠定物质基础。【方法】从兔肌肉组织中抽提基因组DNA作为模板,PCR扩增出FUT2基因,然后将该基因亚克隆入原核表达载体pET30a中,获得重组原核表达质粒pET30a-FUT2。将该重组原核表达质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了FUT2基因,该基因长度为1 044bp。成功构建了原核重组表达质粒pET30a-FUT2,其诱导表达产物分子质量约为45ku;表达的重组FUT2蛋白可与His标签抗体发生抗原抗体反应。【结论】成功克隆了兔岩藻糖基转移酶基因,获得了分子质量约为45ku的FUT2蛋白。

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