文献类型： 中文期刊
作者： 刘笋 1 ; 刘庆慧 1 ; 黄健 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所
关键词： 凡纳滨对虾;β-actin;克隆;表达
期刊名称： 生物技术
ISSN： 1004-311X
年卷期： 2010 年 20 卷 05 期
页码： 6-9
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 目的:克隆凡纳滨对虾肌动蛋白基因并在原核表达系统中表达。方法:根据GenBank上凡纳滨对虾β-actin基因序列设计引物,采用RT-PCR方法,从凡纳滨对虾肌肉组织中克隆出β-肌动蛋白基因cDNA部分序列,克隆序列连接到pBAD/gⅢA质粒,转化入大肠杆菌TOP10,筛选阳性克隆,进行温度诱导表达重组蛋白。结果:克隆序列长度为1300bp,测序结果与Gene-Bank序列同源性达99.91%;获得重组体诱导表达产物经SDS—PAGE分析,在约48kD处有表达的蛋白带,表达产物经Western Blotting鉴定为阳性。结论:获得β-actin基因在大肠杆菌中稳定表达产物。
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