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牛白细胞介素-2在毕赤酵母中的表达(英文)

文献类型: 中文期刊

作者: 陈芳 1 ; 孙红立 1 ; 曹祥荣 1 ; 李震 2 ; 于瑞嵩 2 ;

作者机构: 1.南京师范大学生命科学学院

2.上海市农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 牛白细胞介素2(BoIL2);毕赤酵母;基因表达;pPICZB

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2005 年 25 卷 02 期

页码: 178-182

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 将编码牛白细胞介素 - 2 (Bo IL2 )成熟肽的 c DNA克隆到巴斯德毕赤酵母 (Pichia pastoris)表达载体 p PICZB中 ,构建出含 Bo IL 2基因的重组质粒 Bo IL 2 - p PICZB。将经 Sac 酶切后线性化的 Bo IL 2 - p PICZB电转化到巴斯德毕赤酵母X- 33中 ,转化子经高浓度 Zeocin抗性筛选鉴定后 ,用 1 %甲醇诱导目的蛋白表达。经 SDS- PAGE及 Western blotting检测 ,表明 Bo IL2在酵母中获得了胞内表达 ;通过金属螯合亲和层析 (MCAC)获得纯化的重组蛋白 ;培养小鼠CTL L 2细胞进行活性检测 ,证实所表达的重组 Bo IL 2具有生物活性

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