文献类型： 中文期刊
作者： 杨长庚 1 ; 文华 1 ; 王美姿 1 ; 陆星 1 ; 蒋明 1 ; 田娟 1 ; 喻丽娟 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院长江水产研究所
关键词： 短发夹RNA;罗非鱼;生长抑制特异性基因2;细胞增殖;细胞凋亡
期刊名称： 淡水渔业
ISSN： 1000-6907
年卷期： 2019 年 49 卷 002 期
页码： 27-31
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 探讨低温胁迫下,干扰生长抑制特异性基因2(Gas2)对罗非鱼肾脏细胞系增殖和凋亡的影响.采用脂质体转染法介导Gas2短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)及阴性对照短发夹RNA处理罗非鱼肾脏细胞,24 h后,以5℃/d降温速率对转染后的罗非鱼肾脏细胞进行低温胁迫,分别在25、20、15、10℃ 进行细胞采集.随后,利用实时荧光定量PCR检测Gas2基因及P53基因mRNA表达变化,利用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并开展WST-1细胞增殖实验检测细胞的增殖情况.结果表明,低温胁迫下,阴性对照组及Gas2干扰组中Gas2和P53基因mRNA的表达在15℃ 和10℃ 时均显著升高;Gas2干扰组中Gas2和P53基因mRNA的表达水平在所有温度下均显著低于阴性对照组;随着温度降低,阴性对照组及Gas2干扰组的细胞凋亡率均明显升高,但Gas2干扰组的细胞凋亡率明显低于阴性对照组;低温胁迫下,对照组及Gas2干扰组的细胞增殖率与25℃ 时相比均显著下降;当温度降至15℃ 时,Gas2干扰组的细胞增殖率显著高于对照组.罗非鱼肾脏细胞在受低温胁迫时,抑制Gas2基因能够降低P53基因mRNA的表达水平以及细胞的凋亡率,并增加细胞的增殖.
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