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牛诱导性多能干细胞向心肌细胞的诱导分化

文献类型: 中文期刊

作者: 陈冬梅 1 ; 吕长荣 2 ; 辛晓玲 3 ; 窦忠英 4 ;

作者机构: 1.宁夏医科大学总医院

2.西北农林科技大学西安宠物医院

3.河南省农业科学院畜牧兽医研究所

4.西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心

关键词: 诱导性多能干细胞;细胞分化;心肌细胞;牛

期刊名称: 西北农林科技大学学报(自然科学版)

ISSN: 1671-9387

年卷期: 2010 年 10 期

页码: 1-6

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】研究牛诱导性多能干细胞(Bovine induced pluripotent stem cells,biPSCs)向心肌细胞的分化能力。【方法】将biPSCs悬浮培养制备类胚体,采用类胚体介导体外自由分化与定向诱导分化(添加RA、DMSO和RA+DMSO3种诱导物)的方法,使biPSCs在体外分化,比较了biPSCs在3种不同心肌诱导条件下定向分化为心肌细胞的诱导效率;分别提取biPSCs、类胚体及不同诱导体系分化细胞的总RNA,用RT-PCR检测心肌细胞发育标志基因的表达。【结果】biPSCs在悬浮条件下培养7d,能够形成典型球形和囊腔样类胚体。类胚体再贴壁培养7d,经过免疫细胞化学检测,贴壁细胞大量分化为α-actin阳性的心肌样细胞。在体外诱导分化体系中,RA+DMSO共同诱导的效率较RA和DMSO单独诱导显著增高(P<0.05)。RT-PCR结果显示,各组分化后的细胞中心肌细胞发育特异性基因ACTA2与GATA4均有高水平表达。【结论】biPSCs在体外悬浮培养能够形成类胚体,类胚体贴壁培养后可以分化为α-actin阳性的心肌样细胞;分化形成的心肌样细胞均表达心肌特异性基因。

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