文献类型： 中文期刊
作者： 朱琴 1 ; 康宗利 1 ; 简元才 2 ; 丁云花 2 ; 康俊根 2 ;
作者机构： 1.沈阳农业大学生物科学与技术学院
2.北京市农林科学院蔬菜研究中心
关键词： 甘蓝;雄性不育;orf138;Tail-PCR技术
期刊名称： 中国农学通报
ISSN： 1000-6850
年卷期： 2012 年 28 卷 04 期
页码： 104-109
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 以甘蓝Ogura细胞质雄性不育系为材料,找出能够有效鉴定由orf138导致的甘蓝CMS的标记,并明确此基因在甘蓝OguCMS基因组中的位置。根据萝卜CMS相关基因orf138的序列信息,设计特异引物,并在甘蓝不同类型不育系和保持系中鉴定PCR产物的稳定性。随后利用Tail-PCR技术,扩增获得此基因的侧翼序列并进行了生物信息学分析。根据orf138的全长序列设计引物Bo138300BF/R,在甘蓝不育型材料中,能够稳定扩增出300bp左右的单一条带,而在其他细胞质不育类型和可育材料中均未扩出条带,经多次验证结果稳定可靠。甘蓝中orf138的上下游侧翼序列有效碱基1789bp,通过生物信息学分析,获得包括起始密码和终止密码的orf138的完整序列共417bp。同源性比对结果显示:与甘蓝型油菜、白菜和萝卜的orf138片段具有高度保守性。分析侧翼序列表明甘蓝orf138的3’端是由ORF83、trnfM、ORF125等基因片段构成的一个复杂序列。获得了甘蓝OguCMS特异的分子鉴定标记,明确了orf138在甘蓝线粒体中的位置,以上结果为甘蓝雄性不育的进一步研究奠定良好的基础。
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