文献类型: 中文期刊
作者: 吴学敏 1 ; 陈如敬 1 ; 陈秋勇 1 ; 王隆柏 1 ; 车勇良 1 ; 严山 1 ; 刘玉涛 1 ; 周伦江 1 ;
作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心
关键词: 伪狂犬病病毒;gB蛋白;gC蛋白;串联表达;免疫活性
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2022 年 005 期
页码: 60-65
收录情况: 北大核心
摘要: 为研究新型PRV毒株主要抗原表位,并获得具有良好免疫原性的表位串联体,本研究通过扩增新型PRV FJ-2012株gB、gC蛋白基因片段,经密码子优化后构建串联表达序列,并链接原核表达载体pET-28a(+)克隆位点,转化至BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG诱导表达获得gBC串联蛋白,并用间接ELISA法测定其兔多克隆抗体血清效价,通过Western blot、间接免疫荧光试验评价其免疫活性。结果表明成功构建了PRV-gBC串联蛋白表达体系,并获得新型PRV FJ-2012株gBC串联重组蛋白;ELISA检测其克隆抗体血清效价可以达到1∶6400,Western blot试验显示gBC串联蛋白与多抗血清能产生特异性反应,免疫荧光试验说明克隆抗体血清能与FJ-2012株抗原发生免疫反应。本研究串联表达的新型PRV FJ-2012株gB、gC跨膜区域蛋白具有良好的免疫活性,为进一步研究新型PRV优势抗原表位奠定了基础。
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