文献类型： 中文期刊

作者： 李炜杰 ¹ ; 杨娇 ² ; 何高明 ² ; 王立民 ¹ ; 皮文辉 ¹ ; 周平 ¹ ;

作者机构： 1.新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室

2.石河子大学动物科技学院

关键词： 基因组编辑;Surveyor核酸酶;T7 Endonuclease I;高分辨率熔解曲线(HRM)

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2016 年 32 卷 02 期

页码： 76-83

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得准确的突变信息,除直接测序外,实验初步确定了3种人工核酸酶生物学活性检测方法。利用Surveyor nuclease、T7E1(T7 Endonuclease 1)和HRM(High resolution melt),均以变性退火突变型和野生型DNA序列形成扭曲的双螺旋DNA(distorted duplex DNA)为基础的3种人工核酸酶生物学活性检测方法,确定目标位点是否发生突变。实验成功检测出作用于绵羊MNST基因第一外显子的CRISPR/Cas9和第三外显子的TALEN目标位点发生突变,并对3种检测方法的结果和特点进行了分析比较,得出3种检测方法的优缺点,为实验室分析确定细胞利用非同源末端连接修复DNA双链断裂结果提供参考。