文献类型: 中文期刊
作者: 王磊 1 ; 胡骁飞 2 ; 职爱民 2 ; 刘庆堂 2 ; 孙亚宁 2 ; 邓瑞广 2 ;
作者机构: 1.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室
2.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室;河南科技大学食品与生物工程学院
关键词: 黄曲霉毒素B1;免疫原制备;合成;多抗血清;ELISA
期刊名称: 食品科技
ISSN: 1005-9989
年卷期: 2011 年 36 卷 03 期
页码: 277-281
收录情况: 北大核心
摘要: 目的:研究合成并鉴定了黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源AFB1多克隆抗血清。方法:采用N-羟琥珀酰亚胺酯(N-hydroxy-succinimide NHS)法将AFB1分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原AFB1-BSA和包被抗原AFB1-OVA,采用紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定,通过动物免疫实验获得鼠源多抗血清,并使用间接ELISA和阻断ELISA的方法对多抗血清进行了鉴定。结果:结果表明半抗原AFB1分别和载体蛋白BSA及OVA偶联成功;免疫的6只小鼠效价均达1×10-4以上,3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50(50% inhibitive concentration,IC50)为8.199ng/mL。结论:实验成功合成了AFB1人工抗原,并生产了高效价、高敏感性的鼠源多克隆抗体血清,为AFB1单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制奠定了坚实的基础。
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