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转基因作物中2种除草剂抗性基因aad1和dmo的PCR检测方法

文献类型： 中文期刊

作者： 龙丽坤 1 ; 韩月 2 ; 杨丹丹 2 ; 闫伟 1 ; 李飞武 1 ;

作者机构： 1.吉林省农业科学院农业生物技术研究所

2.哈尔滨师范大学生命科学与技术学院

关键词： 转基因生物;除草剂抗性基因;分子检测;PCR方法

期刊名称： 生物安全学报

ISSN： 2095-1787

年卷期： 2014 年 23 卷 04 期

页码： 278-283

摘要： 【背景】抗除草剂转基因作物是全球种植面积最大的一类转基因植物,以除草剂抗性基因作为检测靶标的分子鉴定方法的研究与应用,对转基因生物安全的检测与监测有重要意义。【方法】根据除草剂抗性基因aad1和dmo的核苷酸序列设计PCR检测引物,并进行PCR反应体系优化、方法特异性、灵敏度、再现性等方面的测试,分别建立aad1基因和dmo基因的特异性PCR检测方法。【结果】建立的PCR检测方法在56~64℃的退火温度范围内均能获得一致性结果,具有良好的稳健性。该方法可将含有aad1基因和dmo基因的转基因作物与其他转基因作物区分开,其灵敏度可分别达到20个拷贝和40个拷贝。通过将aad1基因和dmo基因的检测引物放入同一管PCR反应体系中,还能在一次PCR中同时检测这2个靶标基因,双重PCR的检测灵敏度与单一PCR一致。【结论与意义】建立的分子方法可精准检测出含有aad1基因和dmo基因的转基因作物,具有特异性强、灵敏度高的特点,为抗除草剂转基因作物的筛选检测提供了可靠的技术支撑。

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