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鸡黄病毒RT-PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 王劭 1 ; 陈仕龙 1 ; 陈少莺 1 ; 程晓霞 1 ; 林锋强 1 ; 朱小丽 2 ; 江斌 2 ; 李兆龙 2 ;

作者机构: 1.福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心

2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 鸡黄病毒;RT-PCR;建立;应用

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2012 年 34 卷 07 期

页码: 548-550

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立鸡黄病毒(CFV)分子生物学检测方法,本研究以虫媒介黄病毒基因3'末端通用引物EMF1/VD8作为鉴别引物,以CFV分离株CJD-05为模板,建立了检测CFV的RT-PCR方法。RT-PCR扩增产物测序结果显示,其扩增片段为708 bp,而该方法对其它禽类病毒病原核酸的扩增结果均为阴性,表明该方法具有较高的特异性。扩增的特异性片段与GenBank中CFV、鸭黄病毒和鹅黄病毒序列同源性达到100%、98%和99%。对参考病毒进行梯度稀释检测,该方法检测CFV的敏感度可达10-3TCID50/0.1 mL。采用所建立的RT-PCR方法对2009年福建省部分鸡场的112份临床样品进行检测,结果显示37份为CFV阳性。本研究建立的RT-PCR方法可以作为CFV在临床检测和分子流行病学调查的一种检测方法。

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