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利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒

文献类型： 中文期刊

作者： 刘光清 1 ; 倪征 1 ; 云涛 1 ; 张玉颖 1 ; 杜青云 1 ; 盛祖恬 1 ; 梁华丽 1 ; 华炯刚 1 ; 李双茂 1 ; 陈剑平 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所农业部病毒学与生物技术重点实验室

关键词： 兔出血症病毒;反向遗传学;全长cDNA;RK13细胞

期刊名称： 科学通报

ISSN： 0023-074X

年卷期： 2006 年 51 卷 13 期

页码： 1541-1544

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 在前期构建的兔出血症病毒(rabbithemorrhagicdiseasevirus,RHDV)全长cDNA分子的基础上,利用SP6RNA聚合酶系统,在体外转录合成了病毒RNA.用转染试剂将病毒RNA导入RK13细胞,12h后可见明显致细胞病变(CPE),用间接免疫荧光方法在RK13细胞中检测到了病毒抗原的产生.将收获的细胞培养物再次接种RK13细胞,仍然能产生明显病变.大量收取细胞培养物,经差速离心法纯化病毒后,在电子显微镜下可观察到RHD病毒粒子.结果表明,利用反向遗传学技术获得了可适应于RK13培养的RHDV,为将来研究RHDV的分子致病机理和新型疫苗等提供了有利的工具.

  • 相关文献

[1]利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒. 刘光清,倪征,云涛,张玉颖,盛祖恬. 2006

[2]兔出血症病毒在体外诱导细胞凋亡. 倪征,魏威,刘光清,陈柳,余斌,云涛,华炯钢,李双茂. 2009

[3]兔出血症病毒次结构蛋白(VP2)的生物学功能研究. 刘光清. 2009

[4]转座子在植物功能基因组学中的应用. 雷娟利,徐志豪. 2002

[5]TILLING技术在植物功能基因组及育种中的应用(英文). 汪得凯,孙宗修,陶跃之. 2006

[6]兔出血症病毒次结构蛋白(VP2)的生物学功能研究. 刘光清,倪征,陈柳. 2009

[7]松材线虫actin基因全长cDNA的克隆. 沈卫锋,牛宝龙,翁宏飚,何丽华,刘岩,齐晓朋,孟智启. 2007

[8]山药PAL基因全长cDNA序列的克隆、表达与分析. 王玲平,向珣,韦本辉,李杨瑞. 2008

[9]抗兔出血症病毒抗体的抗独特型抗体的杂交瘤细胞的建立(英文). 盛祖恬,周明龙,唐建东,肖振国,杜念兴,杜青云,何秉耀. 1995

[10]兔出血症病毒衣壳蛋白VP60在杆状病毒表达系统中的表达及细胞内定位. 陈柳,云涛,刘光清,倪征,余斌,宋毅. 2010

[11]兔出血症病毒衣壳蛋白与次级结构蛋白的相互作用. 杨宗伟,倪征,云涛,陈宗艳,李传峰,刘光清. 2012

[12]兔出血症病毒VP60蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 魏威,余斌,倪征,陈柳,云涛. 2009

[13]兔病毒性出血症病毒次要结构蛋白(VP2)的表达和细胞内定位分析. 陈柳,刘光清,倪征,余斌,云涛,华炯钢,李双茂. 2009

[14]兔出血症病毒缺失突变体的构建及鉴定. 谢玉柱,倪征,云涛,陈柳,余斌,刘光清. 2010

[15]兔出血症病毒分子生物学研究进展. 张玉颖,刘光清,吴润. 2006

[16]兔出血症病毒复制子的构建及其在RK-13细胞中的复制. 刘光清,倪征,云涛,余斌,朱金梅,华炯钢,陈剑平. 2007

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