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马鼻肺炎双重荧光定量PCR检测 方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 林志雄 1 ; 鱼海琼 1 ; 王莹 1 ; 佟铁铸 1 ; 温肖会 2 ; 张利 3 ; 翟建新 3 ;

作者机构: 1.广州海关检验检疫技术中心 / 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室

2.广东省农业科学院动物卫生研究所

3.深圳澳东检验检测科技有限公司

关键词: 马鼻肺炎;马疱疹病毒1型;马疱疹病毒4型;实时荧光PCR;特异性;敏感性;分型检测

期刊名称: 广东农业科学

ISSN: 1004-874X

年卷期: 2019 年 46 卷 008 期

页码: 123-128

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: [目的]建立快速、准确检测马疱疹病毒1型(EHV1)和4型(EHV4)的双重荧光定量PCR检测方法.[方法]以EHV1、EHV4的全基因组序列为基础,针对糖蛋白B(gB)基因的保守序列,分别设计EHV1与EHV4特异性引物和探针,筛选引物,优化反应条件,分型检测马疱疹病毒(EHV1、EHV4).[结果]检测到EHV1、EHV4、EIV、EAV、EVJ和EIAV标准毒株,EHV1、EHV4为阳性结果,其余病毒为阴性结果;EHV1、EHV4 DNA模板的最低检出限为1.47×102 copies/μL;检测64份临床样本,阳性检出率为14.06%,病毒分离证实100% 符合.[结论]双重荧光定量PCR检测方法可直接应用于检测并区分EHV1、EHV4,并可在短时间内获得对EHV1/EHV4特异性及敏感性的检测结果.

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